对照组相比，实验组小鼠器官指数无显著差异（P>0.05）；小鼠血清和肝组织中MDA含量显著低于正常对照组（P<0.05），而CAT，GSH-Px和SOD活性均高于正常对照组且具有明显的量效关系。实验结果表明，TFA具有良好的体内抗氧化效果。
关键词：中药学其他学科；菜芙蓉； 总黄酮； 纯化； 体内抗氧化性
中图分类号：TQ461；Q819；R284.2 文献标志码：A
Abstract：In order to optimize the purification conditions and the antioxidant properties in vivo of total flavonoids from Abelmoschus manihot （L.） Medic， AB-8 macroporous resin is used for static adorption and elution.
The optimum purification conditions are as follows： Sample solution concerntration of 0.1 g/mL， pH 3.5， 70% ethanol as eluant， 20∶1（mL/g） of eluant volum to resin weight ratio. The results in the optimum purification conditions show that the purity of TFA reaches 48.50%. There are no significant difference in indexes of mice organs between experimental groups and normal control group （P>0.05）. MDA content exhibits a significant decrease both in serum and liver of mice （P<0.05）. While the level of CAT， GSH-Px and SOD activities in serum and liver are higher in experimental groups than those in normal control group showing dose-response relationship. These results indicate that TFA has good antioxidant properties in vivo.
Keywords：other disciplines of Chinese materia medica； Abelmoschus manihot （L.） Medic； total flavonoids（TFA）； purification； antioxidant properties
菜芙蓉（Abelmoschus manihot（L.）Medic），为锦葵科秋葵属一年生草本植物，主产于河北、河南、甘肃、山东等地。菜芙蓉花具有通淋、消肿、解毒等功效，是中国典籍记载的传统药食两用植物[1]。近年来的研究表明，菜芙蓉花提取物能够降低由CCl4诱导的肝脏损伤程度[2]，降低脂肪细胞中甘油三酯的积累[3]，保护肾小球。植物化学研究表明，菜芙蓉富含天然黄酮类化合物、还原糖类、鞣酸类及长链烃类化合物[4-5]，其中菜芙蓉花中的生物黄酮含量达干重的5.63%[6]，是目前已报道的黄酮类化合物含量最高的植物，具有很高的开发价值。过量的活性氧能够破坏生物大分子（如脂类、DNA及蛋白），诱发癌症、心血管疾病及其他疾病[7-9]。植物类黄酮是天然抗氧化剂，能够抑制氧化，降低体内自由基浓度，螯合金属离子，阻止脂质过氧化[10]。可见，富含天然抗氧化剂的食物对于维持身体健康至关重要，越来越受到人们的关注。
笔者对菜芙蓉花总黄酮（TFA）的提取工艺进行了优化[6]，研究了粗提液对其羟自由基（·OH）、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、超氧阴离子自由基（O-2·）的清除能力，对还原力方面进行了体外抗氧化活性的探索，证实了菜芙蓉花总黄酮粗提液具有很好的体外抗氧化能力，是一种有效的天然抗氧化剂[11]。实验中以菜芙蓉花为原料，利用AB-8树脂对其乙醇提取物从吸附条件和解吸条件两方面进行总黄酮纯化工艺的优化。将纯化黄酮用于小鼠体内抗氧化性实验，研究TFA对小鼠器官指数的影响，测定了小鼠血清和肝脏中的MDA（丙二醛）含量，以及CAT（过氧化氢酶），GSH-Px（谷胱甘肽过氧化物酶），SOD（超氧化物歧化酶）活力的抗氧化指标，以期为菜芙蓉资源的开发利用提供理论依据。
1 材料与仪器
1.1 试药与试剂
药品制备：菜芙蓉花，产自河北井陉县，于8月到10月早晨盛花时采摘，去掉花托后于2 h内进行微波干燥。将干燥至恒重的菜芙蓉干花粉碎，过150 μm（100目）筛。用体积分数为80%的乙醇于90 ℃回流提取2次[12]，第1次以料液比15∶1（mL/g，下同）提取2 h，第2次以料液比7.5∶1提取1 h，合并抽滤得到滤液。将滤液经12 000 r/min离心15 min，真空减压浓缩，得到粗制的菜芙蓉花总黄酮粗提物浸膏，冷冻干燥后得到菜芙蓉总黄酮粗提物。将此菜芙蓉总黄酮粗提物溶于水，配置成不同浓度的上样液用于AB-8树脂吸附。将吸附后的树脂用一定体积分数的乙醇解吸液解吸，经真空减压浓缩至无醇味后冷冻干燥，得到TFA精制物，用于体内抗氧化实验。